淋巴細胞分離液可用于體外分離外周淋巴血細胞,也可以從其他來源中分離單核細胞,包括臍帶血細胞和骨髓細胞,適用于從血液及組織勻漿中分離所需細胞,在醫療和醫學生物中廣泛應用。其他人及動物多種比重細胞分離液。
淋巴細胞分離液操作步驟是哪些?今天由重慶市華雅的小編給大家介紹下。淋巴細胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細胞的分離,也適用于大多數哺乳動物單個核細胞的分離。具有低毒、高得率、高純度等特點。
使用操作步驟:
(1)取新鮮抗凝全血或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。
(2)在離心管中加入適量分離液,將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。
(3)室溫,水平轉子500~1000g,離心20~30min。
(4)離心后將出現明顯的分層:最上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細胞層,離心管底部是紅細胞與粒細胞。
(5)小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心管中, 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞。250g,離心10min。
(6)棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。
(7)重復步驟6;
(8)棄上清,細胞重懸備用。
淋巴細胞分離液原理是什么?
重慶市華雅告訴大家血液中單獨核細胞和淋巴細胞,其容積、形狀和溶解度與別的細胞不一樣,淋巴細胞分離液是某種密度接近1.075∽1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細胞按相對密度梯度分布,進而將各類血細胞多方面分離。
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